면역염색 및 영상화
샘플을 DPBS +/+ 로 간단히 세척한 후, 실온에서 1시간 동안 10% 완충 포르말린 용액에 고정했습니다. 고정액을 제거하고 샘플을 DPBS +/+ 로 3회 세척했습니다 . 칩 샘플은 그대로 두거나 메스로 절편했습니다. 이후, 샘플을 0.125% vol/vol Triton X-100과 1% vol/vol 당나귀 혈청이 첨가된 DPBS +/+ 용액에서 24시간 동안 차단 및 투과 처리했습니다. 샘플을 1차 항체( 표 S2 )에 노출시키고 염색 용액(DPBS +/+ 에 0.5% w/v BSA 및 0.125% vol/vol Triton X-100)에서 4°C에서 24시간 동안 반응시켰습니다 . 반응 후, 샘플을 DPBS +/+ 로 세척했습니다 . 이차 항체와 염색 시약(예: DAPI, 팔로이딘)의 혼합물( 표 S2 )을 염색 용액에 넣고 4°C에서 24시간 동안 샘플과 함께 배양했습니다. 마지막으로 샘플을 DPBS +/ + 로 3회 세척했습니다 . 이미지는 Zeiss LSM 710 공초점 현미경에서 5배, 10배, 20배, 40배 수침형 대물렌즈를 사용하여 획득했습니다. 이미지, 3D 투영, 스택 및 렌더링된 뷰는 FIJI와 Imaris에서 생성했습니다. 그림 설명에 명시된 경우, 일부 샘플은 공기 대물렌즈를 사용한 이미징 전에 Easy Index로 처리했습니다. ImageJ를 사용하여 이미지 처리 및 정량화를 수행했습니다.